Имуноелектрофореза се използва за лабораторно диагностично откриване на моноклонални антитела в пациент кръв. Моноклонални антитела са получени от една и съща клетка и са насочени срещу същите антигени. Поради тази причина те се считат за патологични и, когато бъдат открити, предполагат заболявания като болестта на Waldenström.
Какво е имуноелектрофореза?
Имуноелектрофореза се използва за лабораторно диагностично откриване на моноклонални антитела в пациент кръв. Йоните имат диференциална мобилност. Тази диференциална подвижност формира основата на методите за електрофереза. Тези методи отделят различни вещества един от друг с помощта на електрически полета и гравитацията. Един добре познат метод от областта е имуноелектроферезата. Това е качествена диагностична процедура, използвана за откриване моноклонални антитела. Антителата са имунологично активни протеинови вещества от специфична клетъчна линия. Моноклонални антитела всички произхождат от един и същ В лимфоцит и съответно са насочени срещу един епитоп. Всеки естествен имунен отговор срещу нахлуващи антигени съответства на поликлонален отговор и по този начин е насочен срещу различни епитопи. Следователно моноклоналният имунен отговор предоставя доказателства за патологични процеси в тялото. Моноклонални антитела обвързват различни молекули с висока специфичност. Това свързване може да бъде открито от имуноелектрофореза. Методът е качествена лабораторна диагностична процедура и се състои от двата вида процедури, серумна електрофореза и имунодифузия.
Функция, ефект и цели
Имуноелектрофорезата съчетава методологията на серумната електрофореза с имунодифузия. Серумът на пациента се поставя върху агарозен гел или целулозен ацетатен филм. Прилага се и контролен серум. Прилагането е последвано от електрофоретично разделяне на пробите. Антисеруми, IgG, IgA, IgM, оцетна киселина за нормална електрофореза и капа се прилагат ламбда между разделителните линии. Това създава реакция с антителата на серума на пациента, който генерира валежи. В зависимост от използвания антисерум и позицията и формата на отделните линии могат да се направят изводи за имуноглобулини с каппа или ламбда леки вериги. В случай на ламбда лента присъстват свободни леки вериги от антитела. Използвайки редките IgE и IgD, лабораторията предоставя допълнителни доказателства, които позволяват точно определяне на имуноглобулини. Процедура по имунодифузионна електрофореза се провежда според Пиер Грабар и Къртис Уилямс и съответства на комбинация от агарозна гел електрофореза на протеини и дифузия на антитела. Първо се извършва електрофореза в агарозен гел. Впоследствие съдържащите се антитела дифузират срещу лентите на антигени и по този начин пораждат утаяващи дъги. Това трябва да се различава от имуноелектрофорезата на Laurell's Rocket, която съответства на електрофорезата на протеини в рамките на агарозен гел, всеки от които съдържа антитела в определено концентрация. Гелът съдържа малко основен буфер, който позволява само на антигените да мигрират, изтласквайки по-голямата част от антителата към изоелектричната точка чрез излагане на леко основното рН, докато спрат да се движат електрофоретично. В началото на ракетната имуноелектрофореза има излишък от антиген, така че се образуват разтворими комплекси антиген-антитела. По време на електрофорезата възниква допълнително свързване между антигени и допълнителни антитела. В точката на еквивалентност по този начин се образуват имунопреципитати, наподобяващи ракетни фигури с височина, пропорционална на антигена концентрация. Височината на утайката се измерва за оценка на анализа.
Рискове, странични ефекти и опасности
Откриването на моноклонални антитела е особено важно за диагностицирането на мултиплен миелом и болест на Waldenstrom. Полученото откриване е показателно за злокачествено израждане на имунните клетки. Множественият миелом съответства на a рак от костен мозък характеризиращо се със злокачествено разпространение на клетки, произвеждащи антитела в плазмата. Тези плазмени клетки произвеждат антитела и техните фрагменти. Злокачествените плазмени клетки винаги произхождат от обща прогениторна клетка и по този начин са генетично идентични. Те произвеждат изключително моноклонални антитела. Злокачествеността на това заболяване може да съответства на предраков стадий, но може да достигне и силно злокачествен стадий, който е бързо летален без лечение. Симптомите на заболяването са резултат от злокачествения растеж на клетките или от антителата и фрагментите на антителата. Най-честите симптоми включват болка в костите, разтваряне на костите и спонтанни фрактури на костите. калций нива в кръв често са повишени. В допълнение, абнормните антитела често се задържат в тъканите и причиняват дисфункция на органите, което може олово към прояви като бъбрек неуспех или нарушен кръвен поток. Болестта на Валдстрьом също е злокачествено туморно заболяване. По-конкретно, той е злокачествен лимфом заболяване, което се класифицира като бавно прогресиращо и почти асимптоматично В-клетъчно не-Лимфом на Ходжкин. В повечето случаи при заболяването могат да се открият анормални образувания на моноклонални IgM, които се дължат на дейности на злокачествения лимфом клетки. Болестта на Waldenström е изключително подобна на множествения миелом по своите характеристики, но обикновено показва по-благоприятен ход. Повечето пациенти с болест на Waldenström са до голяма степен асимптоматични до поставяне на диагнозата. Други пациенти показват ранни симптоми като неспецифични умора или периферни невропатии, произтичащи от отлагането на моноклонални IgM в миелинова обвивка. Дори малки количества IgM могат да причинят полиневропатия. При други пациенти полиневропатия не се среща дори при високи нива. В допълнение, неспецифични симптоми като треска, нежелана загуба на тегло, или може да се появи нощно изпотяване. Костна болка също е характерно. Поради свръхпроизводството на IgM, кръвта става хипервискозна, така че горните симптоми могат да бъдат свързани с тези при синдром на хипервискозитет. Това склонност към кървене се проявява в повечето случаи в чести кръвотечение от носа, главоболие, общо чувство на неразположение или замъглено зрение и акустични оплаквания. За откриване на злокачествени заболявания от този тип имуноелектроферезата отдавна се е превърнала в стандартна диагностична процедура.
