Флуоресценцията in situ хибридизация (FISH) е генетичен скрининг метод за откриване на ДНК (Дезоксирибонуклеинова киселина) в ядра на отделни клетки.
Този метод включва използването на специфични ДНК сонди, които могат да предоставят информация само за геномни региони, за които използваната сонда е специфична.
Показания (области на приложение)
- Подозрение за числена хромозомна аберация:
- Откриване на числени хромозомни аномалии (например тризомия 21).
- За количествено определяне на мозайки за хромозомни аберации (напр. В Ullrich-Синдром на Търнър).
- Откриване на микроделеции (напр. Монозомия 22q11.2).
- Откриване на хромозомни аберации (напр. хронична лимфоцитна левкемия (CLL), неходжкинов лимфом).
Горните показания се анализират чрез междуфазен FISH (вж. „Лабораторната процедура“ за подробности).
Процедурата
Необходим материал
- Хепаринова кръв (минимум 1-2 ml)
Подготовка на пациента
- Не е задължително
Разрушителни фактори
- Не е известно
Лабораторният метод
Флуоресцентната in situ хибридизация (FISH) включва използването на флуоресцентно маркирани ДНК сонди (FISH сонди). Те могат да се свържат със специфично ДНК място на хромозома, което се нарича хибридизация. При или след свързване на флуоресцентно маркирана сонда, оценката може да се извърши с помощта на микроскоп. В този процес се определя броят на флуоресцентните сигнали в междуфазните ядра. Освен това, оценка на местоположението (например транслокация / изместване на местоположението / към друга хромозома) при метафаза хромозоми е възможно.
Когато са различни флуоресцентни багрила се използват за различни целеви ДНК в процедурата FISH, тя се нарича многоцветна FISH. Това позволява пълна визуализация на генома.
В някои случаи ДНК сондата не е директно маркирана с флуоресцентно багрило, което се нарича косвена процедура. Вместо това е обозначен с вещества като биотин или дигоксигенин. Този метод се счита за по-сложен, но е по-чувствителен.
