Анализ на замразена секция
Това е необходимо, ако хирургът се нуждае от информация за отстранената тъкан по време на операция, за да вземе решение за хода на процедурата. Например, малък злокачествен тумор се отстранява от бъбрек. Сега е необходим бърз разрез, за да се види дали туморът е напълно отстранен или все още има огромни количества злокачествена тъкан по краищата на тъканните проби.
В крайна сметка резултатът от прегледа на замразената секция определя хода на операцията и по-нататъшния терапевтичен план на пациента. Как работи замразеният преглед на секцията? В рамките на 10 минути тъканта се стабилизира чрез замразяване при -20 ° C, след което се прави разрез с дебелина 5 - 10 μm върху така наречения микротом. Това се поставя върху пързалка, малка стъклена чиния и бързо се оцветява. В края на резултатите се изследват под микроскоп и резултатът може незабавно да бъде изпратен в операционната.
Методи за оцветяване
През последните 120 години са разработени много хистологични методи за оцветяване. Клетъчните структури и тъкани се разделят на базофилни, ацидофилни и неутрофилни клетки въз основа на цветната реакция с оцветяващите агенти. Освен това има и агирофилни и нуклеофилни структури.
Базофилно оцветява всичко, което съдържа киселинна група и е оцветено с основно багрило (например хематоксилин или метиленово синьо). Структурите, които са ацидофилни, са основни и поради това могат да бъдат оцветени с ерозия или киселинен фуксин (киселинни багрила). Те включват цитоплазмата и колаген влакна.
Неутрофилните или липофилните компоненти не могат да реагират нито с кисела, нито с основна боя и следователно не могат да бъдат оцветени. Агирофилните компоненти могат да свързват сребърните йони и да ги превръщат в елементарно сребро. Нуклеофилна (ядро = клетъчно ядро, обичащо клетъчното ядро) цветна реакция е резултат от нуклеофилни багрила в клетъчното ядроТова са ДНК свързващи или основни вещества, които се свързват с нуклеинови киселини.
Днес добре изпитаните химически методи за оцветяване са допълнени с имунологични методи. Реакцията антиген-антитяло се използва в тази техника за откриване на определени клетъчни свойства. След това реакцията може да бъде видима чрез сложна техника.
Често използвани методи за оцветяване са: HE оцветяване = оцветяване с хематоксилин-еозин: Хематоксилинът, естествено оцветител, оцветява всички структури в синьо, които са базофилни (= нежелани към основата) и следователно киселинни, като ДНК, клетъчни ядра, рибозомии др. Еозинът, от друга страна, се произвежда синтетично. Еозинът оцветява всички клетъчни структури в червено, ако са ацидофилни (= киселинни) или основни.
- протеини на цитоплазмата, митохондрии, и колаген са сред тях. Азаново оцветяване: Състои се от първите букви от двата цвята, азокармин G и анилиново синьо-златисто оранжево: Това петна клетъчното ядро а мускулните влакна червени и цитоплазмата червеникави. Колаген и ретикуларните влакна стават сини при това оцветяване.
Оцветяването на Giemsa (Azure-Eosin-Methylene Blue на Giemsa) се използва за оцветяване кръв клетъчни намазки. Клетъчните ядра могат лесно да бъдат разпознати по лилавата цветна реакция. Цитоплазмата оцветява синкаво.
При оцветяването с еластика (резорцин-фуксин-орцеин) всички еластични влакна са показани в черно-виолетово. Методът на ван Гиесън се характеризира с факта, че оцветяването първо се извършва с хематоксилин. След това се използва фукрин на пикринова киселина (микро фуксин) или тиазин на пикринова киселина.
В крайна сметка клетъчните ядра изглеждат черно-тъмнокафяви, цитоплазмата изглежда доста светлокафява. Обратното оцветяване с пикринова киселина тиазин оцветява еластичните влакна и мускулната тъкан в оранжево-жълто и колагеновите влакна в червено. При трихромното оцветяване според Masson-Goldner, размерът на молекулата на багрилото е най-важният фактор в метода на оцветяване.
Използва се железен хематоксилин, обикновено с три допълнителни багрила, а именно киселинна лисица, оранжева G и светло зелена. Оцветява колаген съединителната тъкан и слуз зелено, клетъчни ядра синьо-черни, цитоплазма червени, мускулите бледо червени и червени кръв клетки (еритроцити) оранжево-червено. Освен това има оцветяване по Грам, което служи за диференциране бактерии.
Грам-положителни бактерии са оцветени в синьо, а Грам-отрицателните бактерии са оцветени в червено. Оцветяването на Ziehl-Neelsen също се използва за бактерии, а именно тези, които са устойчиви на киселини и, например, показва туберкулоза патогени в червено. Други методи за оцветяване, които трябва да бъдат споменати тук, са реакцията Берлин-Синьо, която е отговорна за откриването на тривалентни железни йони в тъканните участъци, и метода на оцветяване с железен хематоксилин според Heidenhain.
