Морфология на еритроцитите, фазова контрастна микроскопия

Фазова контрастна микроскопия е диагностична процедура, използвана в урологията и нефрологията (изследване на бъбреците) за изследване и оценка на цитоморфологични жизненоважни проби (образец с живи клетки) при хематурия и диагностика на уринарните утайки. Изключителното значение на този метод се основава по-специално на възможността, подходяща за диагностиката, да се оцени морфологията на еритроцитите (формата на червения кръв клетки), които могат да предоставят ценна информация за произхода на възможна хематурия (кръв в урината) или еритроцитурия (червени кръвни клетки в урината). Фазова контрастна микроскопия утайка от урина е идеална за оценка на различни форми на еритроцити. Въвеждането на фазова контрастна микроскопия рутинната диагностика може да се разглежда като основен напредък, тъй като улеснява разграничаването на патогномоничните компоненти на урината от непатологичните артефакти. Фазово-контрастната микроскопия превъзхожда микроскопията с ярко поле, която се използва до въвеждането на фазова контрастна микроскопия по отношение на диференциацията на артефактите. Ако е налице неясна или неубедителна находка, прибягването до тази процедура може да спести по-малко полезни мерки като радиологична или цистоскопска диагноза (цистоскопия) за гломерулна хематурия (вж. По-долу), като по този начин се намалят разходите и се спестява времето за лечение.

Показания (области на приложение)

Фазово-контрастната микроскопия се използва в урологията и нефрологията за изследване на морфологията на еритроцитите:

• Оценка на цитоморфологични жизнено важни проби при хематурия и диагностика на уринарна утайка. Показания:> 6-8 еритроцити/ l, откриваем в урина или тест с положителна ивица. В контекста на морфологията на еритроцитите, диференциацията на гломерулната хематурия от не-бъбречната еритроцитурия се извършва чрез откриване на дисморфна (гломерулна) и еуморфна еритроцити.
• Дисморфична хематурия с гломерулен произход се открива при пациенти с мембранозна и мембранопролиферативен гломерулонефрит, както и IgA нефропатия, фокална и сегментарна нефросклероза и лупусен нефрит. При гломерулна хематурия еритроцитите се прокарват през повредени базални мембрани на гломерулните капиляри, причинявайки увреждане. Микроскопски човек разпознава дисморфични еритроцити, които също се наричат ​​акантоцити (= еритроцити с „ушите на Мики Маус“).
• Евморфна хематурия (постгломерулна хематурия) се открива при пациенти с бъбречни кисти в разкъсване в кухата система, мехур Билхарзия, кръв примес от влагалището (влагалището), нараняване след поставяне на a катетър на пикочния мехур, кръв нарушения на съсирването и др.

Процедурата

Принципът на фазовата контрастна микроскопия се основава на интерференцията на светлинните лъчи по пътя на лъча на микроскопа, който може да постигне висококонтрастно изображение на неоцветени клетки. Структура и функция на фазово-контрастния микроскоп:

• Пръстеновидният отвор, кондензаторът, пръстеновидната фазова плоча и обективът са от особено значение за функцията на фазовия контрастен микроскоп. Чрез вмъкване на пръстеновидния отвор в кондензатора и фазовата плоча в обектива се причинява разделяне на недифрагирани и дифракционирани светлинни лъчи. Полученото забавяне на дължината на вълната на дифрагираните светлинни лъчи предизвиква фазова разлика, която оптически прави структурните детайли на изследвания микроскопичен обект да изглеждат по-тъмни от околната среда. Физически, фазата тромбоцити преобразувайте разликите във фазата или пътя в амплитудни разлики. В резултат на тези амплитудни разлики изображението на обекта се появява в микроскопа чрез взаимно отменяне или усилване на директните светлинни лъчи, преминаващи през обекта и дифрагирани в обекта.
• По този начин недостатък на този принцип е фактът, че идеалните фазови препарати не са правило, тъй като амплитудните ефекти обикновено се наслагват върху фазовите ефекти.
• Въз основа на принципа на изобразяване на структурите чрез амплитудни разлики, съществуващите клетъчни структури са представени като степенувани нюанси на сивото в зависимост от собствените им оптични плътност. За подобряване на възпроизводството на структурите, използването на тънки препарати и фаза тромбоцити в зависимост от характера на различната фаза тромбоцити, могат да се постигнат както положителни, така и отрицателни фазови контрасти, в резултат на което обектите на интерес се показват или по-тъмни, или по-ярки от заобикалящата ги среда.
• При фазова контрастна микроскопия е по-нататък важно да се отбележи, че некроза (смърт на клетките) може да настъпи сравнително бързо поради излагане на светлина и допълнително увреждане на жизненоважните клетки. В резултат на този бърз некроза разработването, оценката на слайдовете трябва да се извърши в рамките на един до два часа, за да се поддържа валидност на диагностичната мярка. По този начин това ограничение във времето за оценка на жизненоважни проби обикновено изисква документиране чрез фотомикрография или, ако е необходимо, чрез извършване на микрокинематография. Микрофотографията е снимка на микроскопично изображение, направено с камера, прикрепена към микроскоп. Чрез микрокинематографията има възможност за заснемане на обекти под микроскопско наблюдение в движещи се изображения.