Фазова контрастна микроскопия

Фазовата контрастна микроскопия е незаменима диагностична процедура в гинекологията, която значително улеснява изследването на жизненоважни клетки в цервикалната слуз (цервикална слуз) и вагиналните секрети (вагинална течност). В допълнение, тази процедура също така дава възможност за оценка на сперма (семенни клетки).

Показания (области на приложение)

  • Диагностика на вагинална флора - при изследване на вагиналната флора (вагинална флора) са възможни следните изследвания чрез фазова контрастна микроскопия: например диагнозата липса на бактериална колонизация или нормална вагинална флора (млечна киселина бактерии) с или без цитолиза (разрушаване на клетките) може да се направи с помощта на тази диагностична процедура. Освен това е възможно да се идентифицират бактерии в препарата и да ги класифицира в групите неподвижни и подвижни бактерии. В допълнение, биччетата като Trichomonas vaginalis, които принадлежат към групата на паразитите, обикновено могат да бъдат надеждно открити от фазово-контрастния микроскоп. Освен това микозите (гъбични заболявания) могат да бъдат надеждно открити при фазова контрастна микроскопия, така че диагнозата микоза на млечница може да бъде поставена с помощта на фазова контрастна микроскопия. Въз основа на тези диагностични възможности обикновено е възможно откриването на инфекциозна цервикална причина за стерилитет.
  • Възпалителни маркери - чрез фазова контрастна микроскопия, броя и вида на левкоцити (левкоцитна морфология) може да се определи.
  • Определяне на фазата на цикъла - вагиналната цитология се използва за определяне на фазите на цикъла на менструалния цикъл. В този етап на изследване повърхностните (повърхностни) клетки на вагината (вагината) се изследват микроскопски. Клетъчната оценка предоставя информация за текущата фаза на менструалния цикъл на жената. Женският цикъл е разделен на две фази, първата фаза се нарича фоликуларна фаза (фаза на узряване на яйцеклетката), а втората фаза се нарича фаза на жълтото тяло (корпус) лутеална фаза). Трябва обаче да се отбележи, че определянето на фазата на цикъла чрез фазова контрастна микроскопия вече е заменено до голяма степен с хормонална диагностика, което осигурява висока степен на диагностична сигурност.
  • Тестът на Sims-Huhner - тази процедура за изпитване, която се нарича още посткоитален тест, се използва, за да се определи дали сперма (сперматозоиди) могат да проникнат през цервикалната слуз (цервикална слуз), за да достигнат мястото на оплождане.
  • Оценка на сперма - в допълнение към оценката на способността на сперматозоидите да проникват (преминават през) цервикалната слуз, фазово-контрастната микроскопия може допълнително да изследва броя на сперматозоидите, тяхната подвижност и морфология (външен вид).
  • Изследване на цитонамазка - в случай на подозрение, например микоза (гъбично заболяване), има възможност за намазка на влагалището (вагината) или вулвата (съвкупността от външните първични полови органи на жената. Състои се от умилкване и клитор) или евентуално от аналната област, за да се вземе и оцени микроскопски.

Приготвяне на фазов контрастен микроспи, като се използва примерът за оценка на наличната вагинална секреция:

  • В началото на оценката на вагиналната секреция чрез фазов контрастен микроскоп, приготвянето на два подходящи естествени препарата (пресен, нефиксиран, обикновено оцветен препарат от телесни течности, тъкани или съдържание на органи за микроскопско откриване на живи патогени) трябва да бъдат направени.
  • Добавянето на калий разтвор на хидроксид (KOH) и готварска сол към вагиналната секреция. След завършване на смесването комбинираният секрет се нанася върху предметно стъкло и се покрива с покривно стъкло. Впоследствие може да се направи фазово-контрастен микроскопичен анализ.

Процедурата

Принципът на фазовата контрастна микроскопия се основава на интерференцията на светлинните лъчи по пътя на лъча на микроскопа, който може да постигне висококонтрастно изображение на неоцветени клетки. Структура и функция на фазово-контрастния микроскоп:

  • Пръстеновидният отвор, кондензаторът, пръстеновидната фазова плоча и обективът са особено важни за функцията на фазовия контрастен микроскоп. Чрез вмъкване на пръстеновидния отвор в кондензатора и фазовата плоча в обектива се причинява разделяне на недифрагираните и дифракционните светлинни лъчи. от микроскопичния обект, който трябва да се изследва, изглеждат по-тъмни от околната среда. Физически, фазата тромбоцити преобразувайте разликите във фазата или пътя в амплитудни разлики. В резултат на тези амплитудни разлики изображението на обекта се появява в микроскопа чрез взаимно отменяне или усилване на директните светлинни лъчи, преминаващи през обекта и дифрагирани в обекта.
  • По този начин недостатък на този принцип е фактът, че идеалните фазови препарати не са правило, тъй като амплитудните ефекти обикновено се наслагват върху фазовите ефекти.
  • Въз основа на принципа на изобразяване на структурите чрез амплитудни разлики, съществуващите клетъчни структури са представени като степенувани нюанси на сивото в зависимост от собствените им оптични плътност. За подобряване на възпроизводството на структурите, използването на тънки препарати и фаза тромбоцити е посочен. В зависимост от естеството на различната фаза тромбоцити, могат да се постигнат както положителни, така и отрицателни фазови контрасти, в резултат на което обектите, които се интересуват, се правят или по-тъмни, или по-светли от заобикалящата ги среда.
  • При фазовата контрастна микроскопия също е важно да се отбележи, че некроза (смърт на клетките) може да настъпи сравнително бързо поради излагане на светлина и допълнително увреждане на жизненоважните клетки. В резултат на този бърз некроза разработването, оценката на слайдовете трябва да се извърши в рамките на един до два часа, за да се поддържа валидност на диагностичната мярка. По този начин това ограничение във времето за оценка на жизненоважни проби обикновено изисква документиране чрез микрофотография или, ако е необходимо, чрез извършване на микрокинематография. Микрофотографията е снимка на микроскопично изображение, направено с камера, прикрепена към микроскоп. Чрез микрокинематографията има възможност за заснемане на обекти под микроскопско наблюдение в движещи се изображения.

Предимства на фазово-контрастната микроскопия:

  • Незабавна диагностика - спестяваща време и евтина за изпълнение.
  • Относително лесен за изпълнение и следователно бързо обучим и научим.
  • В зависимост от опита на изследователя с относително добра чувствителност (процент на болните пациенти, при които заболяването се открива чрез прилагане на процедурата, т.е. настъпва положителна находка) и специфичност (вероятност, че всъщност здрави хора, които не страдат от болестта също се откриват като здрави от процедурата) засегнати
  • Диагнозата е осъществима без външна помощ (т.е. без лаборатория на трета страна).