едно-ген анализът е целенасочен метод за генетично тестване.
В рамките на тази процедура, ако има съмнение за наследствено заболяване, което се предизвиква от една промяна в a ген, изследва се генът, за който се подозира, че е причинен. Това също често се прави рутинно като част от скрининговите прегледи.
Показания (области на приложение)
- Диагностика на моногенни заболявания, напр циститна фиброза.
Процедурата
Необходим материал
- Хепаринова кръв (минимум 1-2 ml)
Подготовка на пациента
- Не е задължително
Разрушителни фактори
- Не е известно
Лабораторният метод
Най-често методът на секвениране, използван в едно-ген Анализът е методът на Sanger, наричан още синтез на прекратяване на веригата, където първо се стига до изолиране на ДНК от кръв. Тогава всички водород връзките, които служат за задържане на двуверижната ДНК заедно, се разкъсват. След нагряване при 94-96 ° C в продължение на една минута присъстват две единични нишки. След това се получава така наречената хибридизация на праймера, при което се прикрепва грунд. Това става при около 60 ° C. Праймерът е олигонуклеотид (олигомери, съставени от няколко нуклеотида), който служи като отправна точка за репликация на ДНК ензими като ДНК полимераза. След хибридизация на грунд се извършва удължаване, при което температурата се повишава до 72 ° C. Това позволява на праймера да се прикрепи към ДНК полимеразата (ензими които синтезират ДНК). След средно 30 цикъла процедурата може да бъде спряна.
Допълнителен анализ се извършва от капилярен електрофореза в автоматизирани секвенсори. Резултатът се нарича електроферограма. Това показва различни цветове, показващи основната последователност.
По този метод могат да бъдат открити мутации, включващи само една нуклеинова основа в гена, известна също като точкова мутация.
